Pożywka do ekspansji i subklonowania komórek hybrydomy 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Opis produktu

产品名称

Nazwa produktu

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Pożywka do ekspansji i subklonowania komórek hybrydomy

货号 Nr kat

BRS-MED02

规格

Specyfikacja

500 ml/szt

500 ml/butelkę

产品组分

Komponenty

DMEM Maksymalny poziom: 80% (wyłączony)

Medium bazowe DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Płodowa surowica bydlęca (FBS, importowana): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondycjonowane podłoże: 10% (v/v)

青霉素:100 位/ml

Penicylina: 100 j./ml

链霉素:100 位/ml

Streptomycyna: 100 U/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Inne dodatki: czynniki proliferacji pojedynczych-komórek i suplementy małocząsteczkowe

保存条件

Warunki przechowywania

-20 stopni do 18 stopni.

Przechowywać w temperaturze -20 stopni, trwałość 18 miesięcy

使用方法

Instrukcje użytkowania

培养基融化:

37 stopni 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

Czas: 本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Rozmrażanie podłoża:

Rozmrozić pożywkę w łaźni wodnej o temperaturze 37 stopni. Przetrzyj zewnętrzną powierzchnię 70% etanolem i umieść w szafce bezpieczeństwa biologicznego do użycia.
Uwaga: Pojawienie się niewielkiej ilości białego kłaczkowatego materiału po rozmrożeniu jest zjawiskiem normalnym. Pozostawić podłoże na 3–5 minut, aby kłaczki osiadły, a następnie zebrać supernatant do użycia.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等) 0,8-1,5 ogniwa/200 ul/200 ul.

Postępowanie ze studniami termojądrowymi – zdrowe komórki:

W przypadku dołków fuzyjnych z komórkami w dobrym stanie (np. średni kolor normalny lub lekko żółty, komórki pod mikroskopem wydają się zdrowe, jasne i normalnej wielkości), delikatnie pipetuj w górę i w dół żółtą końcówką pipety. Policzyć komórki i umieścić na płytce w ilości 0,8–1,5 komórek/studzienkę w 200 µl pożywki.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Postępowanie ze studniami termojądrowymi – ogniwa nieoptymalne:

W przypadku dołków fuzyjnych z komórkami w nieoptymalnym stanie (np. podłoże zakwaszone/żółte lub komórki wyglądające na pomarszczone, ciemne pod mikroskopem) dostępne są dwie opcje późniejszego subklonowania:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml 本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 ogniwa / 孔 / 200 ul 培养基), 此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Opcja 1: Przenieść komórki ze studzienki fuzyjnej na 24-studzienkową płytkę zawierającą 1 ml tej pożywki. Po 2–3 dniach ekspansji zliczyć komórki i wykonać subklonowanie w ilości 0,8–1,5 komórek/studzienkę w 200 µl pożywki. Na tym etapie podwajanie komórek jest ograniczone, ale stan komórek jest dobry, co czyni je idealnymi do subklonowania.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养基,至37度5% CO2 静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0,8-1,5 ogniwa/孔/200 ul培养基);

Ostrożnie usuń supernatant ze studzienki fuzyjnej za pomocą żółtej końcówki pipety i dodaj 200 µl świeżej pożywki na dołek. Inkubować w temperaturze 37 stopni i 5% CO₂ przez 3–4 godziny. Następnie pobierz próbki komórek, policz i wykonaj subklonowanie w ilości 0,8–1,5 komórek/studzienkę w 200 µl pożywki.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Uwaga: Subklony hodowane z podłożem do ekspansji i subklonowania komórek hybrydoma zazwyczaj osiągają etap odpowiedni do dalszych badań przesiewowych lub analiz w dniach 6–8 po-subklonowaniu.