Pożywka do fuzji i selekcji hybrydom (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基 (HAT)

产品信息 Opis produktu

产品名称

Nazwa produktu

杂交瘤细胞融合筛选培养基(KApelusz)

Pożywka do fuzji i selekcji hybrydom (HAT)

货号 Nr kat

BRS-MED01

规格

Specyfikacja

500 ml/szt

500ml/butelka

产品组分

Komponenty

Wartość DMEM: 80% (kontynuacja)

Medium bazowe DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Importowana płodowa surowica bydlęca (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondycjonowane podłoże: 10% (v/v)

青霉素:100 位/ml

Penicylina: 100 j./ml

链霉素:100 位/ml

Streptomycyna: 100 U/ml

Substancja czynna (hipoksantyna): 100 uM

Hipoksantyna: 100 µM

胸腺嘧啶核苷(tymidyna):16uM

Tymdyna: 16 uM

氨基蝶呤 (aminopteryna): 0,4 uM

Aminopteryna: 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Inne dodatki: Różne cytokiny (wystarczająca ilość) i suplementy

保存条件

Warunki przechowywania

-20 stopni do 18 stopni.

Przechowywać w temperaturze -20 stopni. Okres ważności: 18 miesięcy.

使用方法

Instrukcje użytkowania

培养基融化:

37 stopni 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

Czas: 本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5 min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Rozmrażanie podłoża:

Rozmrozić pożywkę w łaźni wodnej o temperaturze 37 stopni. Przetrzyj zewnętrzną powierzchnię 70% etanolem i umieść ją w szafce bezpieczeństwa biologicznego do użycia.
Uwaga: Pojawienie się niewielkiej ilości białego kłaczkowatego materiału po rozmrożeniu jest zjawiskiem normalnym. Pozostawić podłoże na 3–5 minut, aby kłaczki osiadły na dnie, a następnie ostrożnie zebrać supernatant do użycia.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 stopni 5% CO2 培养箱静置培养.

Fuzja komórkowa i wysiew:

Wykonaj fuzję komórek metodami fizycznymi (elektrofuzja) lub chemicznymi (konwencjonalny PEG). Zawiesić ponownie połączone komórki bezpośrednio w tej pożywce przy odpowiedniej gęstości i objętości:

Elektrofuzja: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ ogniw/studzienkę

Fuzja PEG: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ komórek/studzienkę
Zalecana objętość: 200 µl/dołek w 96-dołkowej płytce.
Inkubować w temperaturze 37 stopni, 5% CO₂ dla hodowli.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Wymiana średniego:

W dniach 4–8 po-fuzji należy wykonać częściową lub całkowitą wymianę podłoża w zależności od stanu wzrostu komórek.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Przeglądanie klonów:

Kiedy klony komórkowe w studzienkach osiągną odpowiednią wielkość, należy przeprowadzić pozytywne badanie przesiewowe klonów.

注意事项

Środki ostrożności

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Ten produkt jest toksyczny i jest przeznaczony wyłącznie do selekcji i hodowli komórek hybrydom. Nie wolno go używać do hodowli żywych zwierząt, celów diagnostycznych ani zastosowań terapeutycznych.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0 等).

Produkt ten nadaje się do selekcji i hodowli komórek hybrydom przy użyciu systemu selekcji HGPRT. Nie ma zastosowania do TK ani innych systemów selekcji. Pożywki tej nie można używać do bezpośredniej hodowli komórek z niedoborem HGPRT-(np. NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Ten produkt jest sterylnym roztworem o pH 7,2–7,4. Wszelkie prace należy wykonywać w warunkach aseptycznych.