Hej tam! Jako dostawca TRAP-14 często jestem pytany o sposób syntezy tego peptydu. Pomyślałem więc, że poświęcę trochę czasu na omówienie procesu syntezy.
Zrozumieć TRAP - 14
Na początek porozmawiajmy krótko o tym, czym jest TRAP - 14. TRAP oznacza peptyd aktywujący receptor trombiny. TRAP-14 to specyficzny peptyd o łańcuchu składającym się z 14 aminokwasów. Odgrywa kluczową rolę w aktywacji receptorów trombiny, które odgrywają ważną rolę w procesie krzepnięcia krwi i innych funkcjach fizjologicznych.
Proces syntezy
Krok 1: Wybór aminokwasów
Syntezę TRAP-14 rozpoczynamy od starannego doboru odpowiednich aminokwasów. Musimy wybierać wysokiej jakości aminokwasy, które są czyste i wolne od jakichkolwiek zanieczyszczeń. Każdy aminokwas ma swoje unikalne właściwości, a znalezienie tych właściwych jest kluczem do syntezy funkcjonalnego peptydu TRAP - 14. Na przykład musimy upewnić się, że grupy zabezpieczające łańcuchy boczne aminokwasów są odpowiednie dla metody syntezy, którą będziemy stosować.
Krok 2: Synteza peptydów w fazie stałej (SPPS)
W większości przypadków do wytworzenia TRAP-14 używamy syntezy peptydów w fazie stałej. Metoda ta została opracowana przez Roberta Bruce'a Merrifielda w 1963 roku i całkowicie zmieniła zasady syntezy peptydów.
Proces rozpoczyna się od przyłączenia pierwszego aminokwasu do stałego podłoża, zwykle żywicy. Żywica zapewnia stabilną bazę dla rosnącego łańcucha peptydowego. Po przyłączeniu pierwszego aminokwasu możemy przystąpić do dodawania kolejnych aminokwasów.
Przed dodaniem każdego nowego aminokwasu musimy go aktywować. Obejmuje to reakcję go z odczynnikiem sprzęgającym. Odczynnik sprzęgający pomaga utworzyć wiązanie peptydowe pomiędzy nowym aminokwasem a rosnącym łańcuchem peptydowym na żywicy. Po reakcji sprzęgania należy zmyć wszelkie nieprzereagowane odczynniki i produkty uboczne.
Jedną z największych zalet SPPS jest to, że można go stosunkowo łatwo zautomatyzować. Możemy użyć syntezatorów peptydów do kontrolowania dodawania aminokwasów, etapów aktywacji i etapów przemywania. To nie tylko przyspiesza proces syntezy, ale także zmniejsza ryzyko błędu ludzkiego.
Krok 3: Odbezpieczenie
Po dodaniu wszystkich aminokwasów, tworząc 14-aminokwasowy łańcuch TRAP-14, musimy usunąć grupy zabezpieczające. Te grupy zabezpieczające dodano wcześniej, aby zapobiec niepożądanym reakcjom podczas procesu syntezy.
Odbezpieczenie zwykle przeprowadza się przy użyciu mocnego kwasu, takiego jak kwas trifluorooctowy (TFA). TFA może rozrywać wiązania pomiędzy grupami zabezpieczającymi i aminokwasami, nie uszkadzając łańcucha peptydowego. Musimy jednak uważać na warunki reakcji, takie jak stężenie TFA i czas reakcji, aby uniknąć jakichkolwiek reakcji ubocznych.
Krok 4: Odszczepienie od żywicy
Po zakończeniu usuwania grupy zabezpieczającej musimy odłączyć peptyd TRAP-14 od żywicy. Odbywa się to również przy użyciu odpowiedniego odczynnika rozszczepiającego. Po rozszczepieniu peptyd uwalnia się do roztworu, a żywicę można usunąć przez filtrację.
Krok 5: Oczyszczanie
Surowy peptyd TRAP-14 otrzymany po rozszczepieniu wymaga oczyszczenia. Istnieje kilka metod oczyszczania, które możemy zastosować, ale jedną z najpowszechniejszych jest wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC).
HPLC oddziela peptyd od wszelkich pozostałych zanieczyszczeń w oparciu o ich różne właściwości chemiczne. Możemy dostosować fazę ruchomą i fazę stacjonarną kolumny HPLC, aby uzyskać najlepszą separację. Po oczyszczeniu możemy otrzymać wysoce czysty peptyd TRAP-14.
Krok 6: Charakterystyka
Na koniec należy scharakteryzować zsyntetyzowany peptyd TRAP-14, aby upewnić się, że ma on odpowiednią strukturę i właściwości. Do określenia masy cząsteczkowej peptydu stosujemy techniki takie jak spektrometria mas. Jeśli masa cząsteczkowa odpowiada oczekiwanej wartości, jest to dobra wskazówka, że synteza przebiegła pomyślnie. Możemy również zastosować spektroskopię magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR) w celu potwierdzenia sekwencji aminokwasów i trójwymiarowej struktury peptydu.
Porównanie z innymi peptydami
Ciekawostką jest porównanie procesu syntezy TRAP-14 z innymi peptydami. Na przykład,PUŁAPKA - 5to kolejny peptyd aktywujący receptor trombiny, ale ma tylko 5 aminokwasów. Synteza TRAP - 5 jest na ogół szybsza i prostsza, ponieważ trzeba dodać mniej aminokwasów. Jednak podstawowe zasady SPPS nadal obowiązują.
Kolejny peptyd,DOTA - E - [c(RGDfK)2], ma bardziej złożoną strukturę. Zawiera cykliczny peptyd i środek chelatujący (DOTA). Synteza tego peptydu wymaga dodatkowych etapów w celu utworzenia struktury cyklicznej i przyłączenia grupy DOTA.
Sekretyna (szczur)jest hormonem peptydowym. Jego synteza również przebiega zgodnie z ogólnymi zasadami syntezy peptydów, ale kolejność i wymagania dotyczące aktywności biologicznej mogą prowadzić do pewnych różnic w warunkach syntezy i metodach oczyszczania.
Dlaczego warto wybrać naszą TRAPĘ - 14
Jako dostawca jesteśmy dumni z naszej wysokiej jakości TRAP-14. Stosujemy rygorystyczne środki kontroli jakości na każdym etapie procesu syntezy. Nasz zespół ekspertów posiada wieloletnie doświadczenie w syntezie peptydów, dlatego możesz mieć pewność, że TRAP - 14, który od nas otrzymasz, jest czysty i funkcjonalny.
Oferujemy również usługi syntezy niestandardowej. Jeśli potrzebujesz zmodyfikowanej wersji TRAP-14 lub peptydu o określonej sekwencji, możemy współpracować z Tobą, aby spełnić Twoje wymagania.
Skontaktuj się z nami w sprawie zakupu
Jeśli jesteś zainteresowany zakupem TRAP - 14 lub masz jakiekolwiek pytania dotyczące naszych produktów, nie wahaj się z nami skontaktować. Zawsze chętnie pomożemy Ci w zaspokojeniu Twoich potrzeb związanych z peptydami. Niezależnie od tego, czy jesteś badaczem w laboratorium, czy firmą pracującą nad rozwojem nowych leków, możemy zapewnić Ci wysokiej jakości TRAP - 14, którego potrzebujesz.
Referencje
- Merrifield, RB (1963). Synteza peptydów w fazie stałej. I. Synteza tetrapeptydu. Journal of American Chemical Society, 85(14), 2149-2154.
- Fields, GB i Noble, RL (1990). Synteza peptydów w fazie stałej z wykorzystaniem 9-aminokwasów fluorenylometoksykarbonylowych. International Journal of Peptide and Protein Research, 35(2), 161-214.