Hej tam! Jako dostawca peptydów katalogowych często otrzymuję pytania dotyczące formułowania tych peptydów do różnych zastosowań. To bardzo interesujący temat i cieszę się, że mogę podzielić się z Tobą kilkoma spostrzeżeniami.
Na początek porozmawiajmy o tym, czym są peptydy katalogowe. Krótko mówiąc, są to gotowe peptydy dostępne w katalogu dostawcy. Peptydy te mają szeroki zakres zastosowań, od badań w biochemii i farmakologii po potencjalne zastosowania terapeutyczne.
Podstawy formułowania
Formułowanie katalogowych peptydów rozpoczyna się od jasnego zrozumienia końcowego zastosowania. Różne zastosowania wymagają, aby peptydy miały określoną postać. Na przykład, jeśli peptyd ma być zastosowany w eksperymencie z hodowlą komórkową in vitro, musi mieć postać łatwo rozpuszczalną w pożywce do hodowli komórkowej. Z drugiej strony, jeśli chodzi o badania in vivo na zwierzętach, kluczowe znaczenie stają się takie czynniki, jak stabilność w środowisku fizjologicznym organizmu i biodostępność.
Pierwszym krokiem w formułowaniu peptydu jest jego synteza. Istnieją różne metody syntezy peptydów, ale najpopularniejszą jest synteza peptydów w fazie stałej (SPPS). W SPPS łańcuch peptydowy jest zbudowany po jednym aminokwasie na stałym podłożu. Metoda ta pozwala na precyzyjną kontrolę sekwencji aminokwasów w peptydzie.
Po zsyntetyzowaniu peptydu należy go oczyścić. Wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC) jest szeroko stosowaną techniką oczyszczania peptydów. Oddziela peptyd od innych zanieczyszczeń na podstawie ich różnych interakcji z fazą stacjonarną i fazą ruchomą. Po oczyszczeniu czystość peptydu sprawdza się za pomocą technik takich jak spektrometria mas.
Formuła do zastosowań badawczych
W badaniach peptydy katalogowe są wykorzystywane w różnych testach. Na przykład w badaniach wiązania receptor-ligand często stosuje się peptydy jako ligandy do badania powinowactwa wiązania i specyficzności receptorów. Aby sformułować peptydy do tych badań, zwykle rozpuszcza się je w roztworze buforowym imitującym środowisko fizjologiczne. Pomaga to zapewnić, że peptyd zachowuje swoją natywną konformację i może prawidłowo oddziaływać z receptorem.
WeźmyEnterostatyna (bydło, psy, świnie)jako przykład. Enterostatyna jest peptydem badanym pod kątem jego roli w regulacji przyjmowania pokarmu. Formułując enterostatynę do badań nad regulacją przyjmowania pokarmu, zazwyczaj rozpuszcza się ją w buforze na bazie soli fizjologicznej. Bufor ten zapewnia stabilne środowisko dla peptydu i jest kompatybilny z eksperymentami in vitro i in vivo.
Innym powszechnym zastosowaniem badawczym jest badanie interakcji białko-białko. Peptydy można zaprojektować tak, aby naśladowały określone regiony białek i stosowano je w celu zakłócania lub wzmacniania tych interakcji. Do takich badań peptydy należy formułować w taki sposób, aby mogły przenikać do komórek, jeśli interakcja zachodzi wewnątrz komórki. W niektórych przypadkach peptydy są sprzęgane z peptydami penetrującymi komórki (CPP), aby pomóc im przejść przez błonę komórkową.
Preparat do zastosowań terapeutycznych
Jeśli chodzi o zastosowania terapeutyczne, formułowanie katalogowych peptydów jest jeszcze bardziej złożone. Peptydy terapeutyczne muszą być stabilne w organizmie, mieć odpowiednio długi okres półtrwania i być w stanie dotrzeć do miejsc docelowych.
Jednym z wyzwań przy formułowaniu peptydów terapeutycznych jest ich podatność na degradację przez enzymy w organizmie. Aby temu zaradzić, stosuje się różne strategie. Na przykład peptydy można modyfikować poprzez dodanie grup chemicznych, które chronią je przed degradacją enzymatyczną. Innym podejściem jest kapsułkowanie peptydów w nanocząsteczkach lub liposomach. Nośniki te mogą chronić peptyd przed degradacją, a także poprawiać jego biodostępność.
Beta - Amyloid (1 - 42), Człowiekto peptyd powiązany z chorobą Alzheimera. W kontekście opracowywania potencjalnych terapii choroby Alzheimera kluczowe znaczenie ma sformułowanie beta-amyloidu (1 - 42) w taki sposób, aby można go było wykorzystać do badania mechanizmu choroby lub jako cel w opracowywaniu leków. Można go formułować w postaci preparatu o powolnym uwalnianiu, takiego jak depot na bazie polimeru, aby zapewnić ciągłe dostarczanie peptydu przez długi okres czasu.
Preparat do zastosowań diagnostycznych
W zastosowaniach diagnostycznych peptydy wykorzystuje się jako biomarkery lub sondy do wykrywania określonych cząsteczek. Na przykład peptydy można zaprojektować tak, aby wiązały się ze specyficznymi przeciwciałami lub antygenami. Przy formułowaniu peptydów do celów diagnostycznych muszą one mieć postać zgodną z testem diagnostycznym.
W testach immunologicznych peptydy często sprzęga się ze znacznikami, takimi jak barwniki fluorescencyjne lub enzymy. Znaczniki te pozwalają na łatwe wykrycie interakcji peptyd-cel. Koniugat peptyd-znacznik formułuje się następnie w buforze odpowiednim do testu immunologicznego, zazwyczaj w buforze, który minimalizuje wiązanie nieswoiste.
Kinaza białkowa C (19 - 36)może być stosowany jako marker diagnostyczny niektórych chorób związanych z nieprawidłową aktywnością kinazy białkowej C. Formułując ten peptyd do celów diagnostycznych, można go skoniugować ze znacznikiem fluorescencyjnym i formułować w buforze zoptymalizowanym pod kątem stosowanego specyficznego testu immunologicznego.
Kontrola jakości w recepturze peptydów
Kontrola jakości jest istotną częścią formułowania peptydów. W przypadku każdej partii peptydów katalogowych obowiązują ścisłe środki kontroli jakości. Obejmuje to sprawdzenie czystości, tożsamości i stabilności peptydów.
Czystość jest zwykle określana za pomocą HPLC i spektrometrii mas. Tożsamość peptydu potwierdza się przez porównanie jego masy i sekwencji z oczekiwanymi wartościami. Testowanie stabilności jest również ważne, szczególnie w przypadku peptydów, które będą przechowywane przez długi czas lub wykorzystywane w długoterminowych eksperymentach. Peptydy są testowane w różnych warunkach przechowywania (np. w różnych temperaturach i wartościach pH), aby upewnić się, że pozostają stabilne.
Niestandardowa formuła
W naszej firmie oferujemy również usługi w zakresie receptur niestandardowych. Jeśli masz na myśli konkretne zastosowanie i potrzebujesz formuły peptydu w określony sposób, możemy współpracować z Tobą w celu opracowania niestandardowej receptury. Może to obejmować dostosowanie składu buforu, dodanie określonych dodatków lub zastosowanie określonego systemu dostarczania.
Niezależnie od tego, czy jesteś naukowcem poszukującym peptydu do następnego eksperymentu, firmą farmaceutyczną opracowującą nową terapię, czy firmą diagnostyczną potrzebującą biomarkera peptydowego, posiadamy wiedzę specjalistyczną, która pozwoli opracować odpowiedni peptyd do Twojego zastosowania.
Jeśli chcesz dowiedzieć się więcej na temat naszych peptydów katalogowych lub naszych usług w zakresie niestandardowych formułowania, nie wahaj się z nami skontaktować. Zawsze chętnie porozmawiamy i omówimy, w jaki sposób możemy zaspokoić Twoje potrzeby w zakresie peptydów.
Referencje
- Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K. i Walter, P. (2002). Biologia molekularna komórki. Nauka o girlandach.
- Goodman, M. i Felix, AM (2003). Synteza peptydów i peptydomimetyków. Metody w enzymologii, 369, 1 - 21.
- Langer, R. i Tirrell, DA (2004). Projektowanie materiałów dla biologii i medycyny. Natura, 428(6982), 487 - 492.